"Ако наше почетне резултате могу поновити друге лабораторије, они ће променити начин на који тренутно размишљамо о узроцима Алзхеимерове болести", каже др Рамон Труллас, професор истраживања у Вишем савету за научна истраживања (ЦСИЦ ) на Институту за биомедицинска истраживања у Барселони и водећи аутор студије. Према његовом мишљењу, ово откриће би могло омогућити тражење ефикаснијих третмана у претклиничкој фази.
Тренутно је једини начин тачне дијагнозе болести постмортем неуропатолошка анализа. Однос познатих биомаркера са болешћу је нејасан, па је готово немогуће дијагностиковати претклиничке стадијуме са правом сигурношћу.
Истраживачи ЦСИЦ-а у свом раду показују да смањење садржаја митохондријалне ДНК (мтДНА) у ЦСФ-у може бити предклинички показатељ Алзхеимерове болести; с друге стране, да може постојати директна узрочно-посљедична веза. Хипотеза је да смањење нивоа ДНК у митохондријама у ЦСФ-у одражава пад способности митохондрија да се хране неуронима мозга, што узрокује њихову смрт.
Смањење концентрације мтДНА претходи настанку добро познатих Алцххеимерових биохемијских биомаркера (бета-амилоид 1-42, Т-тау и п-тау протеина), што сугерише да је патофизиолошки процес Алзхеимерове болести Почиње раније него што се раније мислило и да је његово исцрпљивање у мтДНА можда један од првих предиктора болести.
Поред тога што омогућава истраживање могуће узрочне везе мтДНА и прогресије Алзхеимерове болести, употреба мтДНА као индекса предклиничке Алзхеимерове болести пружа важну предност у односу на претходне биохемијске маркере: откривање овог новог биомаркер нуклеинске киселине Недостају му техничке потешкоће повезане са откривањем протеина. МтДНА се лако може квантификовати квантитативним или реалним временом ПЦР (кПЦР) или 'Доплет Дигитал ПЦР' (ддПЦР).
Пре ове студије, истраживачи нису извештавали да се слободне ћелије које циркулишу мтДНА могу да се открију у хуманом ЦСФ-у. Међутим, помоћу ове студије, тим др. Трулласа успио је квантитативно открити и репродуцирати мтДНА користећи кПЦР, пажљиво оптимизиран придржавањем МИКЕ смјерница.
Апсолутна квантификација циљних молекула
Да би потврдили своје резултате помоћу кПЦР-а, научници су користили дигитални ПЦР систем ККС100 Дроплет Дигитал ПЦР из Био-Рад Лабораториес. За разлику од кПЦР анализа, ККС100 систем пружа апсолутну квантификацију циљних молекула ДНК без потребе за стандардном кривом. Важан фактор за ЦСФ анализу био је да систем „Доплет Дигитал ПЦР“ не захтева прочишћавање узорка да би се уклонили ПЦР инхибитори, као што је неопходно за кПЦР испитивања.
"Доплет дигитални ПЦР" дозволио нам је да валидирамо почетна мерења кПЦР-а, јер пружа апсолутну квантификацију на нивоу једне молекуле без ослањања на стандардну криву ", објашњава Труллас. "Како технологија постаје широко усвојена, очекујемо да ће ддПЦР бити будућност детекције митохондрија ДНК у цереброспиналној течности", додаје он.
Труллас се нада да ће друге лабораторије и болнице успјешно поновити резултате истраживања његове групе, што би потврдило да смањени ниво мтДНА треба истражити као могући узрок Алзхеимерове болести. Проналазећи начин да блокирају ову дегенерацију, доктори ће можда моћи да дијагностицирају и лече Алзхеимерову болест пре него што се појаве симптоми.
Извор: ввв.ДиариоСалуд.нет
.jpg)
